EdU是一種(zhong)胸(xiong)腺嘧(mi)啶核苷類似物(wu)，分子(zi)(zi)(zi)量很小，在動物(wu)體內(nei)能夠(gou)迅速(su)擴散到各種(zhong)組織和中，并滲入(ru)正在復制的(de)(de)DNA分子(zi)(zi)(zi)，通(tong)過基(ji)于Apollo®熒光染料與(yu)EdU的(de)(de)特(te)異(yi)性(xing)反(fan)(fan)應即(ji)可簡單、快速(su)、準確地檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)出細(xi)胞增殖情況。與(yu)BrdU檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)方(fang)法相比，EdU檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)方(fang)法用(yong)量小得(de)多，十分之一的(de)(de)用(yong)量即(ji)可獲得(de)與(yu)BrdU檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)試(shi)(shi)劑盒(he)相同甚至更(geng)(geng)好(hao)(hao)的(de)(de)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)結果(guo)，而(er)且小分子(zi)(zi)(zi)化學(xue)反(fan)(fan)應檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)方(fang)法反(fan)(fan)應快，效率高，反(fan)(fan)應時間需幾分鐘，不需要DNA變性(xing)、蛋(dan)白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠(gou)更(geng)(geng)好(hao)(hao)地保護細(xi)胞形態，更(geng)(geng)簡單、更(geng)(geng)靈(ling)敏、更(geng)(geng)快速(su)、更(geng)(geng)準確。EdU細(xi)胞增殖檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)試(shi)(shi)劑盒(he)使用(yong)時要考慮什么問題？江西哪家公司提供EdU細(xi)胞增殖檢(jian)測(ce)(ce)(ce)(ce)試(shi)(shi)劑盒(he)廠家

EdU（5-溴-2-脫氧尿(niao)嘧啶(ding)）試(shi)劑盒(he)是(shi)一種嘧啶(ding)類(lei)似物，可以在DNA合成(cheng)期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的(de)對比(bi)，大家不難發現，EdU法(fa)檢(jian)(jian)測細(xi)(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)(zhi)(zhi)，無須抗(kang)體，無變性步驟，保(bao)持(chi)細(xi)(xi)胞(bao)形態(tai)和(he)DNA完(wan)整性，是(shi)一種簡單，可靠，省事的(de)創新方(fang)法(fa)。但是(shi)，現在依(yi)然有很多研究者們(men)依(yi)然沒有得到細(xi)(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)(zhi)(zhi)檢(jian)(jian)測*行之(zhi)有效，節(jie)約反應時(shi)間(jian)的(de)方(fang)法(fa)。Abbkine的(de)EdU檢(jian)(jian)測試(shi)劑盒(he)有兩個型號，分別匹配的(de)是(shi)兩種不同的(de)熒光通道，細(xi)(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)(zhi)(zhi)成(cheng)像分析試(shi)劑盒(he)（EdU法(fa)）(綠色(se)熒光)，KTA2030，488通道；細(xi)(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)(zhi)(zhi)成(cheng)像分析試(shi)劑盒(he)（EdU法(fa)）(橘紅色(se)熒光)，KTA2031，549通道河南如(ru)何使用EdU細(xi)(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)(zhi)(zhi)檢(jian)(jian)測試(shi)劑盒(he)哪家好EdU細(xi)(xi)胞(bao)增(zeng)殖(zhi)(zhi)(zhi)檢(jian)(jian)測試(shi)劑盒(he)的(de)基本(ben)結構級(ji)應用。

EdU法中的(de)點擊反應原理(li)圖。摻入到細(xi)(xi)胞DNA中的(de)EdU與熒(ying)光探針或(huo)生(sheng)物(wu)(wu)素等(deng)標記的(de)疊氮化物(wu)(wu)，在銅離(li)子的(de)催化下發生(sheng)共價(jia)反應，形成(cheng)穩定的(de)三唑環，使細(xi)(xi)胞DNA標記上熒(ying)光探針或(huo)生(sheng)物(wu)(wu)素。細(xi)(xi)胞增殖檢(jian)測(ce)(ce)是評(ping)估細(xi)(xi)胞活性、遺傳(chuan)毒性及抗(kang)藥(yao)物(wu)(wu)效果等(deng)的(de)基礎(chu)實驗手段。細(xi)(xi)胞增殖檢(jian)測(ce)(ce)的(de)方法按照原理(li)通(tong)常可以分為五(wu)類：膜損傷檢(jian)測(ce)(ce)、代謝活性檢(jian)測(ce)(ce)、ATP水(shui)平(ping)測(ce)(ce)定、DNA合(he)成(cheng)檢(jian)測(ce)(ce)和細(xi)(xi)胞熒(ying)光標記檢(jian)測(ce)(ce)法。目前公認的(de)精(jing)確的(de)檢(jian)測(ce)(ce)細(xi)(xi)胞增殖的(de)方法是直接檢(jian)測(ce)(ce)細(xi)(xi)胞中DNA的(de)合(he)成(cheng)

EdU標(biao)(biao)記(a)將細(xi)(xi)胞(bao)(bao)完(wan)全(quan)培養(yang)基(ji)中按照(zhao)500:1的(de)比例加入(ru)EdU溶液，制(zhi)成2xEdU標(biao)(biao)記培養(yang)基(ji)；(b)提前將2xEdU標(biao)(biao)記培養(yang)基(ji)預(yu)熱，然后等體積加入(ru)到細(xi)(xi)胞(bao)(bao)原有培養(yang)基(ji)中，獲得(de)lxEdU溶液，其中EdU的(de)終(zhong)濃度(du)為(wei)10uM；注(zhu)(zhu)：1)我們(men)不建(jian)議替換全(quan)部(bu)培養(yang)基(ji)，因為(wei)這樣可(ke)(ke)能會(hui)影(ying)響細(xi)(xi)胞(bao)(bao)增(zeng)殖的(de)速度(du)；2)配(pei)置好的(de)培養(yang)基(ji)建(jian)議現(xian)(xian)用(yong)現(xian)(xian)配(pei)，用(yong)量以(yi)沒過細(xi)(xi)胞(bao)(bao)為(wei)宜；(c)每孔(kong)加入(ru)300ul含EdU培養(yang)基(ji)孵(fu)育(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)2小時，棄培養(yang)基(ji)；注(zhu)(zhu)：1)培養(yang)時間取決(jue)于(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)增(zeng)殖速度(du)和生(sheng)長狀態(tai)；2)大多(duo)數**細(xi)(xi)胞(bao)(bao)以(yi)及粘(zhan)附細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系均可(ke)(ke)采(cai)用(yong)2小時的(de)孵(fu)育(yu)時間(d)以(yi)lxPBS清(qing)洗細(xi)(xi)胞(bao)(bao)兩次(ci)，毎次(ci)5分鐘，以(yi)除(chu)去未摻入(ru)DNA的(de)EdU殘留。注(zhu)(zhu)：貼壁不牢的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)可(ke)(ke)降(jiang)低清(qing)洗強度(du)。你知道EdU細(xi)(xi)胞(bao)(bao)增(zeng)殖檢測試劑盒(he)的(de)特(te)點嗎？

可通(tong)過(guo)(guo)(guo)CellProliferationELISA,BrdU(比色法(fa).)或(huo)(huo)(huo)CellProliferationELISA,BrdU(發光法(fa))進行細(xi)(xi)胞群落中DNA合成(cheng)測(ce)(ce)(ce)定（BrdUbased）。優(you)點是(shi)：實驗結果同(tong)增殖(zhi)(zhi)細(xi)(xi)胞數目(mu)緊(jin)密相關(guan)，可一步完成(cheng)細(xi)(xi)胞的(de)溫(wen)和(he)固定和(he)變(bian)性(xing)，操作方便穩定，不(bu)破壞細(xi)(xi)胞形態(tai)。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI（熒光法(fa)）或(huo)(huo)(huo)KitII（AP）可使用試劑(ji)盒提(ti)供的(de)BrdU單抗(kang)，以及(ji)酶或(huo)(huo)(huo)熒光偶聯(lian)二抗(kang)，檢(jian)測(ce)(ce)(ce)單細(xi)(xi)胞水平的(de)DNA合成(cheng)（BrdUbased）。前者通(tong)過(guo)(guo)(guo)免(mian)疫熒光檢(jian)測(ce)(ce)(ce)，后者通(tong)過(guo)(guo)(guo)熒光顯微鏡檢(jian)測(ce)(ce)(ce)。優(you)點是(shi)：使用核(he)酸酶變(bian)性(xing)DNA，在不(bu)傷害(hai)細(xi)(xi)胞完整性(xing)的(de)情況下使抗(kang)體結合BrdU。EdU細(xi)(xi)胞增殖(zhi)(zhi)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)試劑(ji)盒可以去哪里購買(mai)？江西口碑(bei)好的(de)EdU細(xi)(xi)胞增殖(zhi)(zhi)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)試劑(ji)盒價格

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另(ling)一方面，EdU上的(de)(de)乙炔(gui)基能與(yu)生物(wu)(wu)(wu)素標(biao)記(ji)(ji)(ji)的(de)(de)疊氮化(hua)物(wu)(wu)(wu)(Biotinlabeledazide)通(tong)過一價銅(tong)離(li)子的(de)(de)催化(hua)發(fa)生共價反(fan)(fan)應，形(xing)成(cheng)穩(wen)定的(de)(de)三(san)唑環，該反(fan)(fan)應非(fei)常迅速，被(bei)稱作點(dian)擊(ji)反(fan)(fan)應(Clickreaction)，其反(fan)(fan)應原理參(can)見(jian)圖(tu)(tu)1。通(tong)過點(dian)擊(ji)反(fan)(fan)應，新合成(cheng)的(de)(de)DNA會被(bei)相應的(de)(de)生物(wu)(wu)(wu)素探針(zhen)(zhen)(zhen)所(suo)標(biao)記(ji)(ji)(ji)，從而可(ke)以(yi)使用適(shi)當(dang)的(de)(de)檢(jian)測(ce)設備檢(jian)測(ce)到增殖(zhi)的(de)(de)細胞(bao)。圖(tu)(tu)1.BeyoClick?EdU檢(jian)測(ce)法(fa)中的(de)(de)點(dian)擊(ji)反(fan)(fan)應(Clickreaction)原理圖(tu)(tu)。生物(wu)(wu)(wu)素或(huo)熒光探針(zhen)(zhen)(zhen)等標(biao)記(ji)(ji)(ji)的(de)(de)疊氮化(hua)物(wu)(wu)(wu)(LabeledAzide)與(yu)摻入(ru)到細胞(bao)DNA中的(de)(de)EdU，在銅(tong)離(li)子的(de)(de)催化(hua)發(fa)生共價反(fan)(fan)應，形(xing)成(cheng)穩(wen)定的(de)(de)三(san)唑環，終使細胞(bao)DNA標(biao)記(ji)(ji)(ji)上生物(wu)(wu)(wu)素等探針(zhen)(zhen)(zhen)。本試(shi)劑(ji)盒(he)(he)反(fan)(fan)應簡單、檢(jian)測(ce)靈敏度(du)高(gao)。本試(shi)劑(ji)盒(he)(he)基于簡單高(gao)效(xiao)的(de)(de)點(dian)擊(ji)反(fan)(fan)應，無需(xu)DNA變性，只需(xu)少量的(de)(de)小分子疊氮化(hua)物(wu)(wu)(wu)探針(zhen)(zhen)(zhen)即(ji)可(ke)非(fei)常有效(xiao)地標(biao)記(ji)(ji)(ji)出(chu)摻入(ru)的(de)(de)EdU，并且可(ke)以(yi)檢(jian)測(ce)到單個細胞(bao)的(de)(de)增殖(zhi)情況。江西哪家(jia)公司提供EdU細胞(bao)增殖(zhi)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)(he)廠家(jia)

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